Использование агарозных капсул позволяет выполнять криоконсервацию единичных сперматозоидов.
В этом исследовании проводилась попытка криопресервации малого количества сперматозоидов от мужчин, которым проводится лечения бесплодия, с помощью их помещения в агарозные капсулы. Капсулы помещали в каплю криопротективного раствора и вводили в них 3–4 подвижных сперматозоида, отобранных методом всплывания, используя стандартную технику интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов. Эти капсулы помещали на Cryotop® и замораживали в парах жидкого азота, а затем погружали в жидкий азот, и впоследствии проводили оттаивание и восстановление. Проводился подсчёт подвижных сперматозоидов в капсулах. В конце концов мы выполнили криопресервацию 2142 подвижных сперматозоидов в 702 агарозных капсулах от 26 пациентов, и 1356 (63%) сперматозоидов сохраняли свою подвижность после оттаивания. Показатели подвижности сперматозоидов после оттаивания (ППОТ) варьировали от 20.0% (5/25) до 95.1% (58/61) у разных пациентов. Медиана ППОТ составила 68.3% (межквартильный размах: 46.1–75.7). Общее количество подвижных сперматозоидов, отобранных методом всплывания, сильно коррелировало с ППОТ (r = 0.746). Криопресервация сперматозоидов от пациентов, которым выполнялось лечение бесплодия, с помощью агарозных капсул была возможна. Однако, ППОТ широко варьировала у разных пациентов. Видимо, сперматозоиды из эякулята с большим количеством подвижных сперматозоидов обладают большей резистентностью к заморозке. Требуются дальнейшие исследования с использованием этого метода с криптозооспермическим эякулятом, сперматозоидами из яичка и придатка яичка.
Ключевые слова: агарозная капсула, человеческие сперматозоиды, показатель подвижности, ICSI, криопресервация.
Cryopreservation of very low numbers of spermatozoa from male patients undergoing infertility treatment using agarose capsules
Авторы: Shota Hatakeyama, Susumu Tokuoka, Hiroyuki Abe, Yasuyuki Araki, Yasuhisa Araki
Tokuoka Ladies Clinic, Tokyo, Japan
Graduate School of Health Science, Gumma Paz College, Takasaki, Japan
Graduate School of Science and EngineeringYamagata University, Yonezawa, Japan
The Institute for Advanced Reproductive Medical Technology, Maebashi, Japan
Nippon Reprogenetics, Maebashi, Maebashi, Japan
Yanaihara Women’s Clinic, Kamakura, Japan
Журнал: Human Cell, July 2017, Volume 30, Issue 3, pp 201–208
DOI