Каковы особенности экспрессии FAM71D (семейство родственной последовательности 71, член D) и существует ли ассоциация между экспрессией FAM71D и подвижностью сперматозоидов?
FAM71D — недавно открытый белок, который экспрессируется исключительно в яичках, находится в хвостах сперматозоидов и функционально связан с подвижностью сперматозоидов.
Некоторые специфичные для яичка белки были описаны как потенциальные диагностические биомаркеры для оцеки процесса сперматогенеза и качества спермы. Мы выявили новый специфичный для яичка белок, FAM71D, через микрочиповый анализ, но пока мало что известно о его экспрессии и функции.
Дизайн, объём и продолжительность исследования:
Экспрессия мРНК и белка FAM71D была количественно оценена при развитии яичек мыши. Его локализация в герминальных клетках была определена с помощью иммуногистохимического окрашивания с двумя метками в срезах яичек и мазках спермы. Клиническая значимость оценивалась путём сравнения экспрессии FAM71D в сперматозоидах у контрольных субъектов с нормозооспермией и пациентов с астенозооспермией.
Яички, полученные у самцов мышей C57BL/6 J в постнатальном периоде в возрасте 1, 2, 3, 4, 6, 8 недель и 6 месяцев, и сперматозоиды, полученные в хвосте придатков взрослых мышей методом «всплывания». Человеческие сперматозоиды были изолированы из 100 образцов человеческой спермы с помощью центрифугирования в градиенте плотности Перколла. RT-qPCR и вестерн-блоттинг выполнялись для полуколичественной оценки экспрессии FAM71D в яичках мышей и в сперматозоидах из эякулята субъектов с нормозооспермией и пациентов с астенозооспермией. Иммунофлуоресцентное окрашивание было использовано для определения локализации FAM71D. Анализ ко-иммунопреципитации был выполнен для оценки взаимодействия между FAM71D и кальмодулином. Тест с блокированием антителами был использован для оценки роли FAM71D в подвижности сперматозоидов.
Наши результаты показали, что исключительная экспрессия FAM71D в яичках зависела от возраста. Экспрессия FAM71D демонстрировала динамические изменения в цитоплазме сперматид во время сперматогенеза и в конце концов сохранялась в хвостах сперматозоидов. FAM71D может взаимодействовать с кальмодулином. Использование анти-FAM71D антител на сперматозоидах значимо снижало подвижность сперматозоидов. Уровень экспрессии FAM71D был значительно снижен в сперматозоидах из эякулята пациентов в астенозооспермией (P < 0.05), и он коррелировал с прогрессивной подвижностью сперматозоидов (r = 0.7435, P < 0.0001).
Нет.
Объём выборки был ограничен, поэтому необходимо верифицировать корреляцию экспрессии FAM71D и подвижности сперматозоидов в более крупных когортах. Более того, наши результаты являются описательными, и нужны дальнейшие исследования для прояснения роли FAM71D в подвижности сперматозоидов.
Более широкие выводы из полученных результатов:
Это первое систематическое исследование, в котором документирована экспрессия эндогенного FAM71D и функция, которую выполняет FAM71D в движении сперматозоидов. Оно даёт новые сведения для понимания регулировки подвижности сперматозоидов и причин мужского бесплодия.
Это исследование финансировалось Национальным фондом естественных наук Китая, Фондом естественных наук Гуандуна и Проектом науки и технологии Шэньчжэня. У авторов нет конфликта интересов.
Ключевые слова: FAM71D, хвосты сперматозоидов, кальмодулин, подвижность сперматозоидов, астенозооспермия.
Белок FAM71D экспжессируется в хвостах сперматозоидов, а его дефекты могут быть ассоциированы с астенозооспермией.
The expression characteristics of FAM71D and its association with sperm motility
Авторы: Qian Ma, Yuchi Li, Manling Luo, Huan Guo, Shouren Lin, Jianbo Chen, Y Du, Zhimao Jiang, Yaoting Gui
Guangdong Key Laboratory of Male Reproductive Medicine and Genetics, Institute of Urology, Peking University Shenzhen Hospital, Shenzhen PKU-HKUST Medical Center, FuTian District, Shenzhen 518036, China
Журныл: Human Reproduction, Volume 32, Issue 11, 1 November 2017, Pages 2178–2187
DOI: https://doi.org/10.1093/humrep/dex290