04.11.2017   ·   I.3 Осо­бен­но­сти ди­а­гно­сти­ки муж­чин с бес­пло­ди­ем, Андрология, Новости, Новости андрологии   ·   Пока нет комментариев

Доклиническая оценка ELISA-анализа на белок TEX101 для дифференциальной диагностики мужского бесплодия

Ан­но­тация:

ELISA-тест на TEX101 поз­во­ля­ет опре­де­лить на­ли­чие спер­ма­то­зо­и­дов в эяку­ля­те и раз­ли­чать от­дель­ные ви­ды азоос­пермии.
Preclinical evaluation of a TEX101 protein ELISA test for the differential diagnosis of male infertility

Ак­ту­аль­ность

TEX101 — бе­лок кле­точ­ной мем­бра­ны, ко­то­рый экс­прес­си­ру­ет­ся ис­клю­чи­тель­но гер­ми­наль­ны­ми клет­ка­ми яи­чек и по­па­да­ет в се­мен­ную плаз­му. Мы ра­нее ве­ри­фи­ци­ро­ва­ли TEX101 у че­ло­ве­ка как био­мар­кер для диф­фе­рен­ци­аль­ной ди­а­гно­сти­ки азоос­пер­мии, а те­перь раз­ра­бо­та­ли пер­вый в сво­ём ро­де ELISA-тест на TEX101. Чтобы про­де­мон­стри­ро­вать кли­ни­че­скую при­ме­ни­мость TEX101, в этой ра­бо­те мы по­ста­ви­ли сво­ей це­лью оцен­ку эф­фек­тив­но­сти это­го ELISA-ана­ли­за в круп­ной по­пуля­ции фер­тиль­ных, суб­фер­тиль­ных и ин­фер­тиль­ных мужчин.

Методы

Масс-спек­тро­мет­рия, си­то­вая экс­клю­зи­он­ная хро­ма­то­гра­фия, уль­тра­цен­три­фу­ги­ро­ва­ние и им­му­но­ги­сто­хи­мия бы­ли ис­поль­зо­ва­ны для ха­рак­те­ри­за­ции бел­ка TEX101 как ана­ли­та в се­мен­ной плаз­ме. С ис­поль­зо­ва­ни­ем оп­ти­ми­зи­ро­ван­но­го про­то­ко­ла для пред­ва­ри­тель­ной об­ра­бот­ки се­мен­ной плаз­мы, уро­вень TEX101 из­ме­рял­ся с по­мо­щью ELISA в 805 об­раз­цах се­мен­ной плазмы.

Ре­зультаты

Мы про­де­мон­стри­ро­ва­ли, что TEX101 при­сут­ству­ет в се­мен­ной плаз­ме в ос­нов­ном в сво­бод­ной рас­тво­ри­мой фор­ме, а его ма­лая до­ля бы­ла ас­со­ци­и­ро­ва­на с се­мен­ны­ми мик­ро­ве­зи­ку­ла­ми. Ме­ди­а­на уров­ня TEX101 опре­де­ля­лась у здо­ро­вых фер­тиль­ных муж­чин без ва­з­эк­то­мии (5436 нг/мл, N = 64), у па­ци­ен­тов с необъ­яс­нён­ным бес­пло­ди­ем (4967 нг/мл, N = 277), оли­гос­пер­ми­ей (450 нг/мл, N = 270) и азоос­пер­ми­ей (0.5 нг/мл, N = 137). У фер­тиль­ных муж­чин по­сле ва­з­эк­то­мии (N = 57) и па­ци­ен­тов с сер­то­ли­кле­точ­ным син­дро­мом (N = 13) и об­струк­тив­ной азоос­пер­ми­ей (N = 36) уро­вень TEX101 был неопре­де­ли­мым (≤ 0.5 нг/мл). По­ро­го­вое зна­че­ние 0.9 нг/мл обес­пе­чи­ло 100% чув­стви­тель­но­сти и 100% спе­ци­фич­но­сти для раз­ли­че­ния муж­чин до и по­сле ва­з­эк­то­мии. Ком­би­на­ция кон­цен­тра­ции TEX101 > 0.9 нг/мл и эпи­ди­ди­маль­но-спе­ци­фи­че­ско­го бел­ка ECM1 > 2.3 мкг/мл да­ла 81% чув­стви­тель­но­сти и 100% спе­ци­фич­но­сти для диф­фе­рен­ци­ров­ки меж­ду необ­струк­тив­ной и об­струк­тив­ной азоос­пер­ми­ей, что поз­во­ли­ло от­ка­зать­ся от боль­шин­ства ди­а­гно­сти­че­ских те­сти­ку­ляр­ных биоп­сий. Кро­ме то­го, по­ро­го­вое зна­че­ние ≥ 0.6 нг/мл обес­пе­чи­ло 73% чув­стви­тель­но­сти и 64% спе­ци­фич­но­сти для про­гно­зи­ро­ва­ния успеш­но­го по­лу­че­ния спер­ма­то­зо­и­дов или спер­ма­тид у па­ци­ен­тов с необ­струк­тив­ной азоос­пермией.

За­клю­чение

Мы про­де­мон­стри­ро­ва­ли кли­ни­че­скую при­ме­ни­мость ELISA-те­ста на TEX101 для оцен­ки успеш­но­сти ва­з­эк­то­мии, стра­ти­фи­ка­ции ви­дов азоос­пер­мии и луч­ше­го от­бо­ра па­ци­ен­тов для экс­трак­ции спер­ма­то­зоидов.
Клю­че­вые сло­ва: муж­ское бес­пло­дие, азоос­пер­мия, оли­гос­пер­мия, TEX101, те­сти­ку­ляр­но-экс­прес­си­ру­е­мый бе­лок по­сле­до­ва­тель­но­сти 101, масс-спек­тро­мет­рия, им­мун­ный тест, се­мен­ная плаз­ма, се­мен­ные мик­ро­ве­зикулы.


Авторы: Dimitrios Korbakis, Christina Schiza, Davor Brinc, Antoninus Soosaipillai, Theano D. Karakosta, Christine Légaré, Robert Sullivan, Brendan Mullen, Keith Jarvi, Eleftherios P. Diamandis and Andrei P. Drabovich
Department of Laboratory Medicine and Pathobiology, University of Toronto
Lunenfeld-Tanenbaum Research Institute, Mount Sinai Hospital
Журнал: BMC Medicine, 2017, 15:60
DOI

Предыдущая запись Оценка влияния «периода бессмертия» в урологических исследованиях на примере заместительной гормональной терапии тестостероном
Следующая запись Варикоцелэктомия как метод «улучшения» качества спермы, позволяющий парам использовать менее инвазивные формы вспомогательных репродуктивных технологий
Wordpress Popup Plugin Free