Внеклеточная РНК спермы (вкс-РНК) представляет собой смешанные транскрипты, полученные из мужских репродуктивых органов, и является потенциальным биомаркером для изучения и диагностики заболеваний, связанных с мужской репродуктивной системой. Однако, некоторые клинические факторы, включая возраст, бессимптомное инфицирование Ureaplasma urealyticum (UU), тепловое воздействие на мошонку, продолжительная абстиненция и условия хранения образцов семенной жидкости, могут влиять на характеристики спермы и определение спермальных биомаркеров. В соответствии с этим, дизайн этого исследования подразумевал оценку влияния вышеперечисленных клинических факторов на определение вкс-РНК с целью заложения основ применения этого маркера в исследованиях и потенциального клинического применения. Образцы семенной жидкости собирались в соответствии с выбранными клиническими факторами. Бесклеточная семенная плазма была получена путём центрифугирования, а РНК экстрагировалась при помощи TRIzol LS. Количество селективных органоспецифических для мужской репродуктивной системы вкс-мРНК и вкс-миРНК было измерено с помощью количественной ПЦР в реальном времени. Подсчитывались и сравнивались концентрация и общее количество вкс-мРНК и вкс-миРНК в одном эякуляте. Показатели ACTB, DDX4 (тестикулярно-специфический), WFDC9 (эпидидимально-специфический) и miR-514a-3p (тестикулярно-специфический) значительно возрастали после теплового воздействия на мошонку. SEMG1 (везикулярно-специфический) демонстрировал тенденцию к снижению по мере продления периода воздержания. Возраст, бессимптомное инфицирование UU и условия хранения не показали значительного влияния на определяемые параметры вкс-РНК. Эти результаты показывают, что тепловое воздействие на мошонку значительно влияет на уровень выбранных вкс-РНК яичка и придатка яичка, а продолжительность воздержания может влиять на количество вкс-мРНК семенного пузырька, тогда как другие клинические факторы не имеют значительного влияния на результаты измерений.
Таким образом, тепловое воздействие и срок воздержания следует учитывать при определении уровня вкс-РНК в исследованиях и клинической практике.