Экзосомальная микроРНК в семенной плазме является маркером этиологии азооспермии и позволяет прогнозировать наличие сперматозоидов в тестикулярной ткани

Аннотация

МикроРНК эякулята могут указывать на вероятность получения сперматозоидов при биопсии яичка.

Вопрос исследования

Полезны ли экзосомальные микроРНК (миРНК) в семенной плазме (СП) как маркеры этиологии азооспермии и наличия сперматозоидов в яичке?

Краткий ответ

Наше исследование продемонстрировало потенциал нескольких миРНК в малых экстрацеллюлярных везикулах (мЭЦВ) семенной жидкости как чувствительных и специфичных биомаркеров для отобора пациентов с азооспермией, у которых есть реальные шансы на получение сперматозоидов при тестикулярной биопсии.

Что уже известно

Нет точных неинвазивных диагностических методов для определения этиологии дефектов сперматозоидов в эякуляте и сперматогенного резерва яичка у бесплодных мужчин с полным отсутствием сперматозоидов в эякуляте (азооспермия).

Диагноз у таких пациентов часто основан на результатах биопсии. В этом контексте разумно изучать наличие органоспецифических маркеров в человеческом эякуляте, который содержит жидкость из яичек и мужских репродуктивных желёз, что может помочь в диагностике и определении прогноза при мужском бесплодии.

Кроме того, семенная жидкость содержит высокие концентрации мЭЦВ, которые морфологически и молекулярно соответствуют экзосомам, которые происходят из нескольких клеточных источников в мужском репродуктивном тракте.

Дизайн, объём и продолжительность исследования

Выполнялось проспективное исследование «случай-контроль». В этом исследовании сравнивается содержание миРНК в экзосомах из образцов эякулята девяти фертильных субъектов с нормозооспермией (контрольная группа), 14 бесплодных мужчин с азооспермией из-за недостаточности сперматогенеза и 13 мужчин с обструктивной азооспермией и сохранным сперматогенезом. Кроме того, в исследование было включено три субъекта с тяжёлой олигозооспермией (< 5 × 106 сперматозоидов на 1 мл).

Участники / материалы, условия, методы

Дифференциальный высокомощный анализ профилирования миРНК с использованием панелей для количественной ПЦР на миРНК выполнялся на экзосомах из СП от пациентов с азооспермией и фертильных субъектов.

Основные результаты и влияние случайности

Всего 623 миРНК было включено в стадию миРНК-профилирования в нашем исследовании. Всего 397 миРНК (63.7%) были стабильно обнаружены в образцах всех групп и статистически проанализированы, что показало изменённые паттерны экспрессии миРНК у бесплодных пациентов.

Мы сосредоточились на миРНК, которые различным образом экспрессировались при азооспермии из-за обструкции генитального тракта (т. е. с сохранным сперматогенезом) и при азооспермии из-за сперматогенной недостаточности, и описали на стадии валидации миРНК значения экспрессии одной из миРНК (miR-31-5p) в экзосомах эякулята как предиктивный биомаркер этиологии азооспермии с высокой чувствительностью и специфичностью (> 90%).

Эффективность предиктивного теста была ещё выше тогда, когда в анализ включались значения концентрации ФСГ в крови. Более того, описана была также модель, которая включала значения экспрессии miR-539-5p и miR-941, которая оказалась полезной для прогнозирования с определённой диагностической точностью остаточного сперматогенеза у субъектов с тяжёлыми нарушениями сперматогенеза.

Ограничения, причины для осторожности

Для подтверждения наших результатов нужны дальнейшие исследования с независимой второй популяцией и большей выборкой.

Более широкие выводы из полученных результатов

Наши результаты вносят вклад в поиск самых ценных генетических маркеров, которые потенциально полезны как инструменты для прогнозирования наличия тестикулярных сперматозоидов у субъектов с азооспермией.

Финансирование исследования / конфликт интересов:

Эта работа была финансово поддержана грантами от Fondo de Investigaciones Sanitarias / Fondo Europeo de Desarrollo Regional «Una manera de hacer Europa» (FIS/FEDER) [грант №PI15/00153], Generalitat de Catalunya [грант № 2014SGR5412]. S. L. поддержан программой Researchers Stabilization Program (ISCIII/Generalitat de Catalunya) от Spanish National Health System [CES09/020].

Авторы: Maria Barceló, Ana Mata, Lluís Bassas, Sara Larriba
Human Molecular Genetics Group, Bellvitge Biomedical Research Institute (IDIBELL), 08908 L’Hospitalet de Llobregat, Barcelona, Spain
Журнал: Human Reproduction, Volume 33, Issue 6, 1 June 2018, Pages 1087–1098
DOI | Ссылка на источник