Дифференциальная экспрессия новых биомаркеров (TLR-2, TLR-4, COX-2 и Nrf-2) воспаления и оксидативного стресса при лейкоцитоспермии

Хро­ни­че­ское вос­па­ле­ние мо­че­по­ло­вых пу­тей при­во­дит к лей­ко­ци­то­спер­мии (ЛЦС), уве­ли­че­нию ко­ли­че­ства лей­ко­ци­тов в спер­ме, что, в со­че­та­нии с ок­си­да­тив­ным стрес­сом, мо­жет по­дав­лять функ­ции спер­ма­то­зо­и­дов и про­яв­лять­ся муж­ским бес­пло­ди­ем. В на­сто­я­щее вре­мя по­ста­нов­ка кли­ни­че­ско­го ди­а­гно­за ЛЦС под­ра­зу­ме­ва­ет под­счет ко­ли­че­ства лей­ко­ци­тов вруч­ную и тре­бу­ет слож­но­го окра­ши­ва­ния и ла­бо­ра­тор­ных на­вы­ков или из­ме­ре­ния уров­ня вос­па­ли­тель­ных ци­то­ки­нов и хе­мо­ки­нов. Идио­па­ти­че­ское бес­пло­дие ча­сто про­те­ка­ет бес­симп­том­но. В по­ис­ке луч­ших вос­па­ли­тель­ных мар­ке­ров ЛЦС мы оце­ни­ли экс­прес­сию toll-like ре­цеп­то­ров 2 и 4 ти­па (TLR-2/4), цик­ло­ок­си­ге­на­зы-2 (ЦОГ-2) и ядер­но­го фак­то­ра-2, род­ствен­но­го эритро­ид­но­му фак­то­ру 2, (Nrf-2) в об­раз­цах спер­мы бес­плод­ных муж­чин с ЛЦС и без нее из од­ной воз­раст­ной груп­пы. Мы при­ме­ни­ли спе­ци­аль­ный ва­ри­ант ве­стерн-блот­тин­га с мат­ри­цей ан­ти­тел к ци­то­ки­нам, им­му­но­флу­о­рес­цент­ную мик­ро­ско­пию (ИМФ) с по­сле­ду­ю­щим ком­пью­тер­ным ана­ли­зом и дру­гие ме­то­ды мо­ле­ку­ляр­ной ди­а­гно­сти­ки. В об­раз­цах спер­мы па­ци­ен­тов с ЛЦС (n=47) по срав­не­нию с па­ци­ен­та­ми без ЛЦС (n=38) бы­ли до­сто­вер­но ни­же ко­ли­че­ство спер­ма­то­зо­и­дов (p<0,01), по­движ­ность (p<0,0001), ко­ли­че­ство спер­ма­то­зо­и­дов с нор­маль­ной го­лов­кой (p<0,0001) и бы­ло зна­чи­мо вы­ше ко­ли­че­ство лей­ко­ци­тов (p<0,0001). Диф­фе­рен­ци­аль­ная ха­рак­те­ри­сти­ка про­фи­ля ци­то­ки­нов в се­мен­ной плаз­ме с ис­поль­зо­ва­ни­ем мат­ри­цы ан­ти­тел по­ка­за­ла уси­ле­ние сек­ре­ции не­сколь­ких про­вос­па­ли­тель­ных хе­мо­ки­нов в об­раз­цах па­ци­ен­тов с ЛЦС. Ве­стерн-блот­тинг се­мен­ной плаз­мы па­ци­ен­тов с ЛЦС (n=15) так­же по­ка­зал зна­чи­мое по­вы­ше­ние экс­прес­сии TLR-2 (p<0,001) и 4 (p<0,01), ЦОГ-2 (p<0,001) и Nrf-2 (p<0,001) по срав­не­нию с об­раз­ца­ми спер­мы па­ци­ен­тов без ЛЦС (n=15). Ком­пью­тер­ный ана­лиз спер­ма­то­зо­и­дов па­ци­ен­тов с ЛЦС по­сле ИМФ по­ка­зал уси­ле­ние экс­прес­сии TLR-4 (p<0,001), ЦОГ-2 (p<0,01) и (Nrf-2) (p<0,01). От­ме­че­ны яв­ные раз­ли­чия в рас­по­ло­же­нии этих бел­ков в го­лов­ке и хво­сте спер­ма­то­зо­и­дов муж­чин с ЛЦС. В со­во­куп­но­сти эти дан­ные поз­во­ля­ют пред­по­ло­жить, что TLR-2/4, ЦОГ-2 и Nrf-2 пред­став­ля­ют со­бой но­вые био­мар­ке­ры вос­па­ле­ния и ок­си­да­тив­но­го стрес­са. Сле­до­ва­тель­но, раз­ра­бот­ка быст­ро­го ана­ли­за на эти био­мар­ке­ры мог­ла бы об­лег­чить ран­нюю ди­а­гно­сти­ку и ле­че­ние ЛЦС, в осо­бен­но­сти у муж­чин с идио­па­ти­че­ским и бес­симп­том­ным бес­пло­ди­ем.

МНЕНИЕ ЭКСПЕРТА
— Важ­ным так­ти­че­ским во­про­сом при лей­ко­с­пер­мии яв­ля­ет­ся: тре­бу­ет­ся дан­но­му боль­но­му на­зна­че­ние ан­ти­бак­те­ри­аль­ной те­ра­пии или нет? Из­вест­но, что уве­ли­че­ние ко­ли­че­ства лей­ко­ци­тов воз­ни­ка­ет не толь­ко при ин­фек­ци­он­ном вос­па­ле­нии, но и при уве­ли­че­нии ко­ли­че­ства спер­ма­то­зо­и­дов с по­вы­шен­ной фраг­мен­та­ци­ей ДНК, при на­ли­чии не­зре­лых по­ло­вых кле­ток (не­за­вер­шен­но­го спер­ма­то­ге­не­за) и т.д.
Без­услов­но, пред­ло­жен­ный ме­тод бу­дет иметь прак­ти­че­ское при­ме­не­ние, ес­ли он эко­но­ми­че­ски ока­жет­ся бо­лее вы­год­ным, чем окра­ши­ва­ние спер­ма­то­зо­и­дов пе­рок­си­да­зой, лей­ко­скрин и др. ме­то­ды диф­фе­рен­ци­ров­ки кле­ток.

Ов­чин­ни­ков Р. И.