Цель исследования
Изучить влияние мозгового нейротрофического фактора (BDNF) в замерзающей и оттаивающей среде на свойства восстановленных после заморозки сперматозоидов человека.
Дизайн исследования
Лабораторное исследование.
Условия выполнения
Университетский госпиталь.
Пациент(ы)
Образцы спермы от 21 здорового фертильного мужчины.
Проведённые вмешательства
Мы измерили содержание активных форм кислорода (АФК) с помощью проточной цитометрии с использованием дихлорофлюоресцина диацетата для определения внутриклеточного пероксида водорода (H2O2) и дигидроэтидиума для внутриклеточного супероксид-аниона (O2 -• ), целостность плазматических мембран сперматозоидов с помощью проточной цитометрии, активность каспазы-3 с помощью ELISA и статус Akt- фосфорилирования с помощью Вестерн-блоттинга в сперматозоидах, криопресервированных и размороженных в среде с добавкой BDNF и без добавки BDNF (контроль).
Основные оцениваемые результаты
Подвижность и жизнеспособность сперматозоидов, уровни АФК, активность каспазы-3 и Akt-фосфорилирование.
Результат(ы)
Доля подвижных и жизнеспособных сперматозоидов была значительно выше в группах с добавкой BDNF, чем в группе без добавки BDNF (контрольной группе). Отмечалась значительная разница по статусу Akt-фосфорилирования между группой с добавкой BDNF и контрольной группой. Более того, уровни внутриклеточного H2O2 и активность каспазы-3 были значительно ниже в сперматозоидах, замороженных и оттаявших в среде с добавкой BDNF, по сравнению с контрольной группой.
Заключение
Добавка BDNF в среду, в которой сперматозоиды замораживают и размораживают, имеет защитный эффект в отношении оксидативного стресса и апоптоза в замороженных и восстановленных сперматозоидах человека и может улучшить функцию сперматозоидов, возможно, посредством активации Akt.